FAQ
FAQ Bioluminescence
Quelles luciférases sont compatibles avec l’Hikarazine™ ?
L’Hikarazine™ a été spécialement conçue pour être utilisée avec des enzymes luciférases dérivées d’Oplophorus gracilirostris.
Quelle Hikarazine™ dois-je utiliser ?
Le choix entre l’Hikarazine™ Z108 et l’Hikarazine™ Z103 dépend du dosage que vous souhaitez réaliser:
- Pour les tests où l’intensité de bioluminescence est primordiale, tels que la microscopie à bioluminescence et l’imagerie des petits animaux, l’Hikarazine™ Z108 est le meilleur choix.
- Pour les tests nécessitant des temps de réaction plus longs, l’Hikarazine™ Z103 est recommandée. Bien qu’il soit légèrement moins lumineux, certains utilisateurs rapportent également un meilleur rapport signal/bruit dans certaines conditions.
Quel tampon dois-je utiliser avec Hikarazine™ ?
Le choix du tampon est crucial pour une bioluminescence optimale. Il est recommandé d’utiliser du PBS, mais d’autres tampons peuvent être utilisés en fonction du test réalisé.
Par exemple, l’ajout de 0,01 % de Tween peut aider avec des matrices complexes, malgré une légère augmentation du bruit de fond.
De plus, la luminosité et la demi-vie de bioluminescence peuvent être modifiées selon les des compositions cationiques. Si vous avez besoin de conseils supplémentaires, veuillez contacter nos experts.
Quels sont les facteurs qui influencent le processus d’émission de lumière et la luminosité ?
Comme pour le substrat de référence, l’émission de lumière et la luminosité de l’Hikarazine™ sont influencées par plusieurs facteurs :
- La quantité d’oxygène disponible sur le site de la luciférase,
- La composition du tampon, qui peut favoriser la relaxation non radiative du substrat activé,
- La température, qui peut affecter l’activité de la luciférase et la stabilité du complexe enzyme-substrat, modifiant ainsi l’intensité lumineuse,
- La concentration ionique, en particulier les cations divalents, qui peuvent influencer l’efficacité de la réaction de bioluminescence,
- Le pH du milieu, un pH inapproprié pouvant altérer l’activité de la luciférase,
- La présence de cofacteurs ou d’inhibiteurs, certains composés pouvant améliorer l’efficacité de la réaction, tandis que d’autres pouvant la réduire.
Ces facteurs doivent être optimisés pour assurer les meilleures performances du pro-substrat bioluminescent Hikarazine™.
Quelles sont les conditions de stockage optimales pour une stabilité maximale du pro-substrat ?
Pour assurer une stabilité jusqu’à deux ans, conservez les flacons à température ambiante, à l’abri de la chaleur, de la lumière et de l’humidité.
Pourquoi la poudre pro-substrat change-t-elle légèrement de couleur ?
Une légère altération de la couleur de la surface de la poudre peut se produire avec le temps. Cependant, cela n’affecte pas son efficacité, à condition que le pro-substrat soit utilisé dans des conditions standard préconisées dans la notice.
Quelles sont les conditions de stockage optimales pour la solution mère ?
La solution mère est acide, ce qui améliore sa stabilité.
Stockée à 4°C, elle reste stable pendant 6 mois.
Elle peut être également stockés à -20°C pour une durée de vie supplémentaire. Il conviendra alors de réaliser des tests régulièrement pour valider sa stabilité.
Quel est le pic d’émission de l’Hikarazine™ ?
Le pic d’émission de bioluminescence des luciférines activées Hikarazine™ Z103 et Z108 a été mesuré à 450 ± 3 nm.
Quelles sont les recommandations pour l’imagerie des petits animaux ?
Les substrats de l’Hikarazine™ contiennent des atomes de fluor. La présence de ces derniers améliore leur solubilité et leur biodisponibilité pour l’imagerie des petits animaux.
Pour des résultats optimaux, la concentration sanguine finale doit être d’environ 13,6 μM au point de luminescence, ce qui correspond à l’injection de 80 μL de Z103 ou de Z108 à 1,35 mM par souris (en supposant un volume sanguin moyen de 8 mL).
L’Hikarazine™ est-elle dépendante de l’ATP ?
Non, contrairement aux systèmes bioluminescents basés sur les lucioles, les systèmes bioluminescents marins, y compris l’Hikarazine™, ne nécessitent pas d’ATP.
Les substrats d’Hikarazine™ sont-ils brevetés ?
Oui, les substrats d’Hikarazine™ sont brevetés sous EP3615516, US11938199 et JP7366752.
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