Expression
de protéines
en système
E. coli.
Nous sommes biodesigners de protéines
Outre les technologies acellulaires, l’équipe Synthelis possède également une grande expertise dans la production de protéines en système E. coli. Selon le type de protéine, nous vous proposerons de travailler en expression cytoplasmique ou en expression périplasmique. Nos services vont de l’étude de faisabilité jusqu’à la production en fermenteur de 10 L. Chaque projet comprend de manière standard les étapes suivantes :
Le design et la préparation du vecteur d’expression
Cette étape inclut le choix du vecteur d’expression, l’optimisation de séquence, et l’ajout d’une étiquette (tag). D’autres options, telles que la création d’une protéine de fusion, l’insertion de mutation…sont également possibles.
La sélection du système d’expression et des conditions optimales
Nous effectuons à cette étape un criblage de différentes conditions de culture et /ou de plusieurs souches afin d’obtenir la meilleure quantité et qualité d’expression de la protéine d’intérêt.
La production et l’extraction de la protéine
Nous pouvons aller jusqu’à une échelle de 10 L de culture afin de couvrir des besoins allant du milligramme au gramme.
De la biomasse ainsi obtenue, la protéine sera extraite selon le type d’expression choisi, de la simple extraction chimique pour une expression périplasmique à la solubilisation de corps d’inclusion et la renaturation (refolding) pour les protéines insolubles.
La purification de la protéine
Nous pouvons vous proposer toutes les techniques courantes de chromatographie : affinité, IEC, HIC, et SEC selon le niveau de pureté souhaité.
La formulation finale
Le choix du tampon final est un point qui peut s’avérer critique, notre expérience pourra vous aider dans ce choix, afin de vous offrir la meilleure solution selon votre application.
Développement de procédés et industrialisation
Notre équipe est là pour vous accompagner si vous souhaitez améliorer votre procédé de production ou changer d’échelle. Nous disposons d’un fermenteur de 10 L, d’équipements de purification et surtout d’une expertise qui vous permettront de poser les premiers jalons dans le développement et la réussite de votre projet. N’hésitez pas à nous contacter pour en savoir plus.
Par ailleurs, nous pouvons accéder à d’autres systèmes si votre projet le nécessite.
Prenez rdv avec notre équipe pour en discuter.
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vos questions
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La biotech
qui murmure
aux oreilles
des protéines.
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