FAQ
FAQ Bioluminescence
Quelles luciférases sont compatibles avec l’Hikarazine™ ?
L’Hikarazine™ a été spécialement conçue pour être utilisée avec des enzymes luciférases dérivées d’Oplophorus gracilirostris.
Quelle Hikarazine™ dois-je utiliser ?
Le choix entre Hikarazine™ Z108 et Hikarazine™ Z103 dépend de votre dosage spécifique. Pour les applications où l’optimisation du rendement lumineux est cruciale, telles que la microscopie à bioluminescence et l’imagerie des petits animaux, Hikarazine™ Z108 est généralement le meilleur choix.
Pour les applications nécessitant des temps de surveillance plus longs, l’Hikarazine™ Z103 est recommandée. Bien qu’il soit légèrement moins lumineux, certains utilisateurs signalent également une amélioration du rapport signal/bruit dans des conditions spécifiques lors de l’utilisation de Hikarazine™ Z103.
Quel tampon dois-je utiliser avec Hikarazine™ ?
Le choix du tampon est crucial pour une bioluminescence optimale. Le PBS est recommandé, mais d’autres tampons peuvent être utilisés en fonction du dosage. Par exemple, l’ajout de 0,01 % de Tween peut aider avec des matrices complexes, bien qu’il puisse légèrement augmenter le bruit de fond. De plus, des compositions cationiques variables peuvent influencer à la fois la luminosité et la demi-vie de bioluminescence. Si vous avez besoin de conseils supplémentaires après avoir testé votre test spécifique, veuillez contacter nos experts.
Quels sont les facteurs qui influencent le processus d’émission de lumière et la luminosité ?
Comme pour le substrat de référence, l’émission de lumière et la luminosité de l’Hikarazine™ sont influencées par plusieurs facteurs :
- La quantité d’oxygène disponible sur le site de la luciférase,
- La composition du tampon, qui peut favoriser la relaxation non radiative de l’état excité du substrat,
- La température, qui peut affecter l’activité de la luciférase et la stabilité du complexe enzyme-substrat, modifiant ainsi l’intensité lumineuse,
- La concentration ionique, en particulier les cations divalents, qui peuvent influencer l’efficacité de la réaction de bioluminescence,
- Le pH du milieu, car un pH inapproprié peut altérer l’activité de l’enzyme luciférase,
- La présence de cofacteurs ou d’inhibiteurs, car certains composés peuvent améliorer l’efficacité de la réaction, tandis que d’autres peuvent la réduire.
Ces facteurs doivent être optimisés pour assurer les meilleures performances du système bioluminescent utilisant l’Hikarazine™.
Quelles sont les conditions de stockage optimales pour une stabilité maximale du pro-substrat ?
Pour assurer une stabilité jusqu’à deux ans, conservez les flacons à température ambiante, à l’abri de la chaleur, de la lumière et de l’humidité.
Pourquoi la poudre pro-substrate change-t-elle légèrement de couleur ?
Un léger assombrissement de la surface du solide peut se produire avec le temps. Cependant, cela n’affecte pas le signal de bioluminescence, à condition que le pro-substrat soit utilisé dans des conditions standard (c’est-à-dire à une concentration finale de 13,6 μM).
Quelles sont les conditions de stockage optimales pour la solution stock ?
La solution mère est acide, ce qui améliore sa stabilité. Lorsqu’il est stocké à 4°C, il reste stable pendant 6 mois. Pour une stabilité accrue, il peut être stocké à -20°C, avec des tests continus pour déterminer la durée exacte.
Quel est le pic d’émission d’Hikarazine™ ?
Le pic d’émission de bioluminescence des luciférines activées Hikarazine TM Q-103 et Q-108, dérivées de l’Hikarazine™ Z103 et de l’Hikarazine™ Z108, a été mesuré à 450 ± 3 nm.
Quelles sont les recommandations pour l’imagerie des petits animaux ?
Les substrats de l’Hikarazine™ contiennent des atomes de fluor, ce qui améliore leur solubilité et leur biodisponibilité pour l’imagerie des petits animaux. Pour des résultats optimaux, la concentration sanguine finale doit être d’environ 13,6 μM, ce qui correspond à l’injection de 80 μL de Z103 ou de Z108 à 1,35 mM par souris (en supposant un volume sanguin moyen de 8 mL).
L’Hikarazine™ est-elle dépendante de l’ATP ?
Non, contrairement aux systèmes bioluminescents basés sur les lucioles, les systèmes bioluminescents marins, y compris l’Hikarazine™, ne nécessitent pas d’ATP.
Les substrats d’Hikarazine™ sont-ils brevetés ?
Oui, les substrats d’Hikarazine™ sont brevetés sous EP3615516, US11938199 et JP7366752.
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