Purification
de protéines.
Nous sommes biodesigners de protéines
Nous pouvons vous proposer les principales techniques de chromatographie et notre savoir-faire pour définir les bonnes conditions afin de purifier votre protéine d’intérêt. Ainsi, selon le niveau de pureté attendu, nous pouvons mettre en œuvre :
Différentes chromatographies d’affinité (IMAC, protéine A…)
Elles utilisent soit l’affinité propre de la protéine (anticorps, protéase par exemple), soit celle de l’étiquette qui lui est associée, pour purifier la protéine de façon très sélective même dans un mélange complexe. Ces techniques permettent d’obtenir rapidement une protéine avec un bon niveau de pureté.
La Chromatographie par Échange d’Ions (IEC)
C’est une méthode prédictive utilisant le point isoéléctrique (pI) de la protéine pour réaliser sa purification. Bien qu’ayant une sélectivité limitée, elle est très robuste et peut être efficacement utilisée en première intention, notamment avec des protéines sans étiquette (tag).
La Chromatographie par Interaction Hydrophobe (HIC)
Elle utilise les domaines hydrophobes de la protéine afin de la retenir sur une résine. Cette technique, certes peu prédictive, peut servir en complément d’une autre méthode.
La chromatographie par exclusion de taille (SEC)
Elle est basée sur le diamètre apparent de la protéine (dépendant de sa masse moléculaire et de son état oligomérique). Cette technique est très efficace pour améliorer la pureté d’une protéine et modifier le tampon final.
Nous sommes aussi en mesure de vous proposer des méthodes complémentaires selon les propriétés physicochimiques des protéines.
Dans le cas des protéines membranaires au format protéoliposomes, la purification est réalisée par sédimentation sur gradient de saccharose. Ceci permet de purifier la fraction de liposomes ayant intégré la protéine membranaire d’intérêt, mais ne permet pas d’éliminer toutes les impuretés protéiques issues du lysat bactérien de notre système acellulaire.
Afin d’éliminer les interférences éventuelles de ces impuretés dans votre application, nous vous proposons des protéoliposomes « contrôle négatif » contenant les mêmes impuretés mais sans votre protéine d’intérêt.
« Designons ensemble le futur de vos protéines bioactives »
Bruno Tillier – Directeur des Opérations Synthelis
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des protéines.
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